Livin基因RNAi表达载体的构建及其沉默效应观察

现代肿瘤医学3讨论

20 09年 1月

第 1第 1期 7卷

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【参考文献】[] H uS LagS H uhA . hrc rai ftoL R gns 1 s Y, i G, se J C aati t no G e e n ez o wh moo o st o a orpi n hrt pnrcpo wi xrc l o lg u og n d t n a dty r i e e tm t eta e— o o o h hlrlu ie— r h rp as n a G rti— c u ld. e e— a e cn i eet c a d poen o pe 8v n

G R 8属于 G蛋白偶联受体的糖蛋白激素受体亚家族， P4 与其他糖蛋白激素受体如卵泡刺激素受体 ( S R)甲状腺 FH、

刺激素 (S R、 TH )黄体生成素受体 ( H ) L R等进行同源结构分析的结果显示， P 4 G R 8受体具有 3个主要的功能区域是： N端胞外结构域 (—53个氨基酸残基 )7跨膜结构域 (4 1 4、 54— 85个氨基酸残基 ) C端细胞质区域 (0 0和 8 6—9 1个氨基 5

t s e bae g n J . o E dc nl19,: 3 14 . r m m r r i[] M l n or o, 8 1 1 0— 8 5 n a ne o i 9 2 8 [] L bE, r s r S, i Q e a C r o m l oMz o f 2 o D B us d R L ,t . h m s a I i t no o a u 1 o o c a iGP 8, o e l c p ti omo e r c p o ie GP R4 a n v l gy o r e n h r n e e t rlk CR, n h - o i u

ma n ue wi a it n h b d a d itrp cf a k rs na d mo s t rda o y r h i i n nese ic b c c s i e

酸)。为了研究 G R 8的生物学功能，年来人们构建 P4近 G R 8基因敲除鼠模型， P4发现 G R 8因敲除鼠出现胚胎 P4基子宫内生长发育迟滞，围产期死亡率增高；以及卵巢、副睾、 输精管畸形。这些结果提示 G R 8可能跟组织生长发 P4育及分化移动有相关性。 在以往的研究中，我们采用 R A干扰技术， N在体外合成

m pi[] C t e e C lG nt 00 8: 5 ap g J . y g t e e e, 0, 2— . n on

l 2 9 [] G o, igw , i m t ,t 1U—r u t no G R 8 3 a Kt a a H r a uY e a p e li f P 4 Y a K a s . g aoid c db o n—rg lt no 27 p n a c scrio el n u e yd w e ai fp Kil e h e acn mac l u o n

ivs ees n t ts[] C n e e,0 6 6: 2 nai ns ad me sai J . acrR s 20, 6 16 3— v a s 116 . 1 31

[ 4] G oY, igw a Kt a aK,hm d a S iaaM,t 1G n rino acntu vl e . eeao f stt e a t o ii ya t emua to u n R4/L ci tn fh ma GP 8 GR4。—p ti v aG o r en—cu l e o pe r. d

能够特异性抑制 G R 8基因表达的 s N转染人子宫颈癌 P4 i A, R细胞 H l, ea通过体外侵袭实验观察转染后癌细胞侵袭能力的变化。结果发现， P 4因表达下调能显著降低子宫颈癌 G R 8基

cp rJ . M dSi 06 8: 1 19 e t[] J e, 0, 1— 0 . o c2 1 0 [] M r r D, e t M Hs hm syi r r nadsi l o 5 e e L B a . io e ir n a b i n n r c rP t c t t a p acd wt a t o yd c t h hl y oi n e p r J . i a i d i t a t c o cs k i r e t[] h nn b e d r e e e t nA c oNe r s iL t, 9 7, 2 9 u o c e t 1 9 2 5: 7一1 0. 0

细胞的侵袭转移。此外，我们还发现 G R 8的过表达与大 P4肠癌细胞的侵润转移密切相关。

目前对于 G R 8受体的结构和功能了解还非常有限， P4 重要原因之一是缺乏有力的工具，抗体是研究蛋白的重要工具。本研究利用获得的 G R 8特异性片断作为抗原， P4制备了抗 G R 8的单克隆抗体，白免疫印迹实验结果证明该 P4蛋单抗有很好的特异性；体外侵袭性实验结果提示， P 4 G R 8单克隆抗体能够有效抑制子宫颈癌细胞的侵袭转移。以往的研究结果提示， P 4 G R 8的高表达是肿瘤发生、发展中的重要分子生物学事件，可

作为提示肿瘤分化、侵袭和淋巴结转移

[]巴德年. 6当代免疫学技术与应用[]北京： M.北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，9 8 3 1— 6 . 19:5 3 4[] Maebu S B u yD S d,t . ecn i hrpa— 7 zro￣, ol M,u oS e a L uie—r et e 1 cec nann G rti o tii g, p en—c u ld rc po ulmie ehbtit u o o pe e e tr4 n l c x ii nr— atrn rwt train ascae t mb y nc a d p rⅡ tl eie go h r ad to so it w h e ro i n ei丑a e d i

l a t J . o E dc nl 0 4 1: 4— 2 4 e l[] M l nor o, 0,8 2 1 25 . h y t i i 2 2 [] M ni ,ar t, a ho , . e c v ps a l e 8 ed e Lue V S or G ea D f t e ot t — vF nP n e e t 1 e i n adv lp n fte mae rpo u tv rc n L eo me to l rd c e t ti GR4 k o k u c h e i a nc o tmie

[] D vBo,06,9 4 1— 3 . J . e i 2 0 2 0:2 4 4 l[] K t, t b r Ma u e 1Lu ie i pa—cn 9 a S Ma uaaM, t oT,t . ecn—rhr et o— o s s a cet n gG poen ope cpo一 ( GR G r8 sesn i n ai rt—cu l r etr 4 L 4, p4 )i se— i de

的一项新的指标。特异性的抗 G R 8单克隆抗体的制备对 P4于与 G R 8 P 4相关的肿瘤的治疗有重大意义；检测 G R 8在 P4

肿瘤细胞中的表达情况，可以早期发现具有转移潜能的肿还瘤。此外，该抗体的制备将使该受体在不同组织器官定位成为可能，从而为其功能的阐明奠定基础。

tl o r a dvl m n i mc[] N pr x eh l i r e l e o et n i J . e h n E p N p r, a f n e p e o o

20, 46— 5 06 1: 7. 0 3

(校：编张志明 )

Lv基因 R A表达载体的构建及其沉默效应观察 in i Ni焦伊胜张

淑兰王永来。刘晓梅王桂玲，,,,

C nt cin o iN e tr fk e e a d o s raino ssln e e ie c o sr t f R A v co Mn g n n bev t fi i c fc n y u o s o o t e iJA i h n, HANG S u—ln, A I O Y—se g Z h a W NG o g—liL U Xio—me, A u—l g Yn a,I a i W NG G i i n

Segi o i lf l t hn dcl nvrt,hnagI0 0 C ia hnj gH s t f i e o C iaMei i sy Seyn 10 4,hn . n p aA a d f i a U ei

【 bt c】 O jcv:oc sut c r xr s g hr ap tf ec R A(h N )f in ee n A s at r beteT nt ca et p sn o ii iee ne N sR A oLv n d i o r v oe e i s t r nn rr h ig ao s r ei f ce c M eh d: o r s RNA s q e c str ei g h ma i i e e wee d s n d, f r s nh ss b e v t e in y. s i to s F u h e u n e ag t u n L vn g n r e i e at y t e i n g e

【收稿日 20期】 08—0 0 3—1

【回1期】 20 0修 3 0 8— 4—2 3沈阳沈阳 10 0 10 4沈阳 10 0 10 4

【基金项目】辽宁省教 …… 此处隐藏：17291字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……