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科研界的新宠-crisprcas9(6)

时间:2025-07-14   来源:未知    
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基因敲除的实验过程

1、在把基因序列中寻找NGG序列获得其附近20多个碱基的序列,与tracrRNA序列融合,设计出sgRNA并合成该序列。

2、将该序列以及cas9基因连入如图所示载体。

3、转化感受态,质粒小提,测序验证。

4、细胞培养与细胞转染

5、敲除效果检测。

6、建立稳定敲除的细胞株

Cas9质粒构建

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