复方格列吡嗪片人体生物利用度及生物等效性研(2)

生物利用度

吡嗪!"#$%、盐酸二甲双胍!#&$%，批号：!&&#&’!(，标示量：含格列吡嗪(’"))*、盐酸二甲双胍+&&",(*，由江西万基药物研究院有限责任公司研制提供。参比制：格列吡嗪片，规格：!"#$%.片，批号：!&&#&)&!，剂（-）

标示量：+&&")*，批准文号：国药准字/0’&!!((#，迪沙药业集团有限公司生产；盐酸二甲双胍片，规格：&"!#%.片，批号：!&&#&0&1&，标示量：(1"#*，批准文号：国药准字/))&!)1#0，深圳市中联制药有限公司生产。

仪器：高效液相色谱仪为2%34567++&&系列，包括8+0!!2在线脱气机，8+0++2四元泵，8+0+02自设定!&!4进样检测。盐酸用!#&!4流动相复溶，

二甲双胍检测的血浆处理方法为于+"#$4离心管（KL管）中准确加入待测血浆&"#$4，加入’&*高涡旋0&M，离心，取上清液)&!4进样检氯酸0&!4，测。

!"’$血浆标准曲线的制备

+"#"+N格列吡嗪血浆标准曲线的制备N于1只+&$4具塞试管中依次加入不同量的盐酸格列吡嗪标准品溶液，再各加入空白血浆+"&$4，制备终浓度分别为!#、#&、+&&、!&&、)&&、,&&、1&&、+&&&6%.$4的动进样器，8+0+,2温控箱，8+0+#9二极管阵列检测器，2%34567化学工作站（-5:2"+&"&!"［+’#’］）；电子分析天平（29!&);2）；涡旋混合器（<=;1&）；石英亚沸高纯水蒸馏器（>?@;##&）

!"#$给药方法及血浆样品采集

根据药物制剂人体生物利用度和生物等效性试

验指导原则［+］

，选取!&名健康男性志愿者，采用单

盲、单剂量、随机、!A!交叉实验设计。即将!&名健康受试者随机分为!组，每组各+&名。第+组先服参比制剂，然后服试验制剂，两次服药相隔+周。第!组先服试验制剂，间隔+周后服参比制剂。给药前+!B进清淡晚餐后禁食过夜，于次日早晨空腹口服试验制剂或参比制剂，用!&&$4温开水送服。服药后!B可饮水；服药后)B进统一标准午餐。采血总时间为!)B。

服药前取空白血，服药后分别于&"#、+"&、+"#、!"&、!"#、0"&、)"&、,"&、1"&、+!"&、+,"&、!)"&B取静脉血#"&$4，注入肝素化的试管，离心取血浆，C,#D冰冻保存备测。

!"%$色谱条件

格列吡嗪检测的色谱条件：色谱柱为E+1，流动相为乙腈F水（0’F,0，!"!），流速为+"&$4.$36。检测波长为!’)6$，柱温为)&D，检测灵敏度为&"+$2G。

盐酸二甲双胍检测的色谱条件：色谱柱为E+1，流动相为乙腈F水F0$$H4.I>J>（00F+’F#&，!"!），流速为+"&$4.$36。检测波长为!0)6$，柱温为0#D，检测灵敏度为&"+$2G。

!"&$血浆样品的处理

格列吡嗪检测的血浆处理方法为准确吸取待测血浆样品+"&$4于+&$4具塞试管中，加入+&!%.

$4的卡马西平内标工作液0&!4，混匀后加入+$H4.I盐酸溶液+&&!4。再加入乙醚#"&$4，漩涡混匀!$36后静止+&$36分层。转移上层有机相于另一刻度离心管中，)&D水浴条件下氮气流吹干。

血浆标准系列。按+")项处理后分别测定并计算格列吡嗪峰面积#3和内标的峰面积#M，以#3.#M为纵坐标，以所对应各点浓度（$）为横坐标绘制标准曲线。经最小二乘法线性回归，得格列吡嗪的标准曲线回归方程。

+"#"!N盐酸二甲双胍血浆标准曲线的制备N于’只+"#$4离心管（KL管）中依次加入不同量的盐酸二甲双胍标准品溶液，再各加入空白血浆&"#$4，制备终浓度为&"&#、&"+、&"!、&")、&"1、+",、0"!!%.$4的血浆标准系列。按+")项处理后分别测定并计算盐酸二甲双胍峰面积#，以峰面积#为纵坐标，以所对应各点浓度（$）为横坐标绘制标准曲线。得到平衡加权的直线回归方程。

!"($精密度和回归率实验

分别准确配制#&、!&&、1&&6%.$40个浓度的格列吡嗪样品及&"+&、&")&、+",&!%.$40个浓度的

盐酸二甲双胍样品，每种浓度#份，按+")项方法处理。分别在同日及连续#日内重复测定#次，计算日内、日间变异及回收率。上述0种浓度的->J均在+#*范围内。

!")$数据分析

采用药代动力学程序J2>（OPQ%Q6OM7Q73M73RM，S5PM3H6!"&）计算药代参数并进行等效性分析。#$结果

#"!$回归方程

格列吡嗪的标准回归方程为#3.#MT&"#+#0$U&"&+,(，%T&"(((#；盐酸二甲双胍回归方程为#T+!’"!0&($U+")+1&，%T&"(((1。

#"#$回收率

结果见表+。

#"%$药代动力学参数

试验制剂和参比制剂的血浆药物浓度经J2>程序处理，用非房室模型估算药代动力学参数。!&名健康志愿者单剂量口服试验与参比制剂的主要药