仪,仪器通道选择F1通道。荧光信号收集设在60℃,
收集方式设为SINGLE。其它类荧光PCR检测仪的具
体循环程序设置方法请参照以上设置方法以及各类仪
器使用说明书和实际情况而适当调整。
结果分析条件设定
1.使用PE Gene Amp 5700/7000荧光PCR检测仪进
行结果分析时基线(baseline)的确定:取6—10或
6—15个循环的荧光信号。阈值(threshold)设定原则以
阈值线刚好超过正常阴性对照品扩增曲线(无规则的
噪音线)的最高点,且Ct值=40.0为准。
2.使用PE Gene Amp 7700荧光PCR检测仪进行结
果分析时基线(baseline)的确定:取3—10或3—15
个循环的荧光信号。阈值(threshold)设定原则以阈值线
刚好超过正常阴性对照品扩增曲线(无规则的噪音线)
的最高点,且Ct值=40.0为准。
3.使用BIO-RAD iCycler进行结果分析时,基线
(baseline)取为2—10或2—15个循环的荧光信号,
阈值(threshold)设定原则以阈值线刚好超过正常阴性
对照品扩增曲线(无规则的噪音线)的最高点,且Ct
值=0.0为准。也可根据仪器噪音情况在15.0—40.0之
间调整。(在使用以上荧光检测仪进行分析的过程中,
为避免漏检强阳性样本,应首先将基线定为