MALDI-TOF MS操作规程

MALDI-TOF MS操作规程

(一) 样品测试步骤

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9 需做样的同学，在早9：00之前，标记好自己的样品（样品标记：以袁江北为例，命名为YJB1，YJB2,以此类推），放入质谱的样品架上； 操作质谱者在样品登记格中登记样品； 根据登记格中的位置在靶板上点样； 15 min后，待样品干燥后，在仪器Standby的状态下，单击Exp.Tech中的Open door，约为1 min，样品室门打开； 戴上PE手套或洗干净手，将靶板正确放入样品室； 单击Exp.Tech中的Close door按钮关闭靶板门； 等待真空度下降，一般约为15 min，一般为pum2小于5.0×10即可进行样品分析； 单击Exp.Tech中的Operate，待飞行时间管出现红线即可； 开始样品分析，按照操作规程进行；

分子量校正步骤：

（a） 设置质谱分析的参数设置，主要有：Firing中的power（一般50左右）；Blank参数应大于待分析样品的最小质量数（至少大于300Da，一般越大越好谱图越干净）；样品采集的质量数设置（pulsed ectraction optimised at），一般为样品中最大分子量的2/3；Exp.Tech中Turning mode：一般为Reflectron（分子量低于6000Da适用）；

（b） 打开Camera窗口；

（c） 右键点击靶板的放大镜，输入校正点的位置（如A10，不分大小写），回车键；按照靶板上的位置，开始分析样品（点击Fire，Power由低（50）到高开始分析，一般不要高于110，避免损坏激光源）；

（d） 新建文件夹（每次做样均需新建文件夹，文件夹命名为20130320，按日期命名，一个月保存在一个文件夹目录下），保存样品，命名为Cal0001;

（e） 点击Processing中的找校正文件，单击打开；点击Calibration开始校正；校正完毕后，点击save，关闭校正窗口；

10 校正完毕，按照样品登记表中登记的样品信息，仔细进行样品分析。样品分析、保存和校正数据一

样（以袁江北为例，命名为YJB10001，YJB10002,YJB20001,以此类推）；

11 做完样，单击Standby，在Standby的状态下，单击Open door，取出靶板，放在培养皿中；单击

Close door； -5

12 关闭软件、电脑。

注意事项：

每次使用完质普后，请及时把枪头盒里的枪头补满；

使用完点样枪，将移液枪的量程调到最大，悬挂在枪架上；

在MALDI-TOF MS记录本中登记做样的数目和仪器的使用状态。