MALDI-TOF MS操作规程(2)

一． 靶板的清洗

1.带上手套，将样品靶放入Lock_Lock盒中，倒入色谱纯级乙腈，溶剂浸没靶板，超声5-10分钟。

2.将溶剂换成色谱纯甲醇，浸没靶板，超声5-10分钟。

3.将溶剂换成50%甲醇+50%millipore纯水，超声5分钟。

4.将溶剂换成100%millipore纯水，超声5分钟。

5.将靶板取出，自然晾干即可。

注：如样品靶板特别脏，在第一步前用丙酮超声10分钟

二． 基质的选择

本实验室有以下三种基质选择

1.CHCA基质:5-10mg/ml (50%ACN,50%H2O,0.1%TFA) 多肽及小分子样品

2.DHB 基质:10-20mg/ml (50%ACN,50%H2O,0.1%TFA) 糖类及小分子样品

3.SA 基质：10-15mg/ml (50%ACN,50%H2O,0.1%TFA) 大于一万的蛋白及大分子样品

4.Dithranol基质：10-15mg/ml (100%THF,0.1%TFA) 聚合物样品

三．点样方式

1.混匀法: 样品及基质1:1的比例在Ep管内混合均匀，取1ul点靶，自然晾干。

2.覆盖法：移液枪取0.5ul样品，点靶，自然晾干。取0.5ul基质，覆盖到样品上，自然晾干。

3.三明治法：移液枪取0.5ul基质，点靶，等5-10s将基质吸走，形成基质的薄膜。取0.5ul样品，点靶，自然晾干。再取0.5ul基质点靶覆盖，自然晾干。

一般选用覆盖法点样。