瑞格列奈片的制备和质量标准研究(3)

　第6期　丁钢,等.瑞格列奈片的制备和质量标准研究557

验证试验:按正交试验筛选出的最佳处方压制片剂,经溶出度试验,测得3个批号的瑞格列奈片的30min时的累积溶出率为(98.25±1.78)%,确定该处方为瑞格列奈片的处方。2.3　含量测定方法学的建立2.3.1　溶液的制备2.3.1.1　对照品溶液　精密称取瑞格列奈对照品20mg,置100mL容量瓶中,加甲醇超声溶解并稀释

称定,研细,精密称取适量(相当于瑞格列奈2.5

mg)置50mL容量瓶中,加流动相至刻度,超声15min溶解,0.45μm微孔滤膜过滤,弃去初滤液,取续滤液即得。2.3.2　色谱条件　色谱柱:DIKMAC18柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇2磷酸盐缓冲液(210g磷酸二氢铵溶于1000mL水中,加磷酸调节

-1

pH至2.5)(体积比70∶30);流速:1.0mL min;检测波长:243nm;柱温:40℃;进样体积:20μL。瑞格列奈色谱峰的理论塔板数为36393,对照品及样品的色谱图见图1。

至刻度,摇匀,得对照品储备液。取对照品储备液2.5mL,置10mL容量瓶中,加入流动相稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液。2.3.1.2　供试品溶液　取瑞格列奈片20片,精密

A.瑞格列奈片供试品;B.瑞格列奈对照品;C.空白辅料

图1　瑞格列奈HPLC色谱图

Figure1　HPLCchromatogramsoftabletsandreferencesubstanceofrepaglinideandblankexcipients

2.3.3　标准曲线及线性范围　精密吸取40.0、50.0、60.0μg mL的供试品溶液,每个浓

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“2131111”项中的对照品储备液0.5、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0、5.0mL,分别置10mL容量瓶中,用流动相度分别平行做3份;另取瑞格列奈对照品同法配制

-1

对照品溶液(50μg mL)。按“2.3.2”项下色谱条件进样测定,按外标法以峰面积计算回收率,结果见表4。

表4　瑞格列奈的回收率试验结果

Table4　Resultsofrecoverytest

m(加入量)/m(测得量)/回收率/

稀释至刻度,摇匀,按上述色谱条件测定峰面积,以

峰面积(A)为纵坐标,以质量浓度(ρ)为横坐标进ρ+0.0544,r=行线性回归,得回归方程:A=0.1828

1.0000,表明瑞格列奈质量浓度在9.905～99.05

μg mL-1范围内与峰面积呈良好线性关系。

2.3.4　精密度试验　取对照品溶液(50μg mL

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平均回收率/%

RSD/

mg39.6040.4440.2049.8949.9150.4860.0160.0060.28

mg40.9240.7440.3050.3049.8550.6860.3560.3660.81

%103.32100.75100.24100.8299.89100.40100.57100.60100.90

%

),连续进样6次,记录峰面积。结果峰面积的

RSD值为0.30%,表明仪器精密度良好。

2.3.5　稳定性试验　取“2.3.1.2”项的供试品溶

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液(50μg mL)分别于日内测定5次和连续5d

测定,结果日内RSD值为0.28%,日间RSD值为0151%,表明供试品溶液稳定。

2.3.6　回收率试验　分别精密称取瑞格列奈原料

100.830.98

药40.0、50.0、60.0mg及按处方配比量相当于瑞格列奈50mg相应的辅料,置100mL容量瓶中,用流动相稀释至刻度,超声15min溶解,精密移取上清液5mL至50mL容量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,0.45μm微孔滤膜滤过,分别得质量浓度为

2.3.7　最低检测限与定量限　取空白基线一段,计

算其噪音的平均峰高,再将瑞格列奈对照品溶液用流动相稀释至适当浓度,进样20μL,使其峰高为噪