0%以上
e) 半衰期适当:125I半衰期60天、131I半衰期8天、3H半衰期12.5年
3) 分离技术:双抗体法;沉淀法(聚乙二醇法);吸附分离法(活性炭吸附法);双抗体沉淀法(PR试剂法);固相分离法。
* 质量控制
1) 质量控制:就是利用一些客观的指标,经常对分析质量进行检查,遇有质量异常则及时采取对策,以保证分析误差控制在可接受的范围。
2) 质量控制的目的:证实验分析误差控制在可接受的范围。判断试剂盒质量和方法学的稳定性。
34. 实验室内部质量控制:
* 零标准管结合率( Bo %)
1) Bo%指:Ag=0时,*Ag与Ab的最大结合率。
2) 最大结合率不是越高越好,最大结合率过高(80-90%)可能影响RIA的灵敏度。有时为了提高灵敏度把最高结合率调到30-50%,以提高灵敏度。
* 非特异结合率(NSB%)
1) 当Ab=0时,*Ag与非特异性物质的结合率。
2) 一般应小于5-10%。NSB越低越好。NSB的高低可以反应B与F分离技术的好坏。如:双抗法的NSB低;PEG法的NSB高。
* 标准曲线直线回归参数
1) 标准曲线的主要质控指标:截距a、斜率b和相关系数r
2) 要求a、b值稳定,r>0.99
* ED25、ED50、ED75
1) 指B/B。× 100%(结合率)=25%、50%、75%时,横坐标上所对应的浓度值。
2) 主要用来反应标准曲线的稳定性,可以判断标准曲线的漂移情况。曲线向右漂移ED值升高。曲线向左漂移ED值降低。
3) 试剂盒稳定、实验操作正确则每次的ED值,应在一定范围波动。如波动异常,表明标准品变质或用量有误。
35. 评价RIA试剂盒质量的指标
* 精密度:是指同一样品重复测定的实测值的离散程度。离散程度越小,表明分析系统的精密度越高。常以变异系数(CV)表示。
* 准确性:就是指统计上能与零剂量相区别的最小量。一般指测定方法的最小可检出量。既B。×90%所对应的值。
* 灵敏度:是指样品的测定值偏离真值的程度。
回收率:回收率越接近100%说明该方法准确度较好。
回收率=测定值/真实值×100%
* 特异性
* 稳定性
* 健全性
36. 免疫放射分析
* 基本原理:免疫放射分析法是利用过量的标记抗体与非标记抗原形成复合物,用免疫吸附剂除去多余的游离的抗体,发现复合物的放射性与非标记抗原的量呈正相关。
* 特点:
1) 反应动力学:非竞争性抗原抗体结合反应。Ag-*Ab复合物的量与非标记抗原的量呈正相关。
2) 灵敏度:灵敏度高出RIA
10倍。特别在低剂量区。
3) 特异性
4) 稳定性
5) 标准曲线的工作范围宽
6) 缺点:抗原必须有两个以上的抗原决定簇。
37. 放免法与免疫放射法的比较
RIA IRMA 标记物抗原抗体结合剂的量(Ab)限量过量结合反应式竞争性非竞争性灵敏度较
